danke !! hat mir sehr geholfen. Muss das morgen machen und hatte ein mulmiges Gefühl, aber nach diesem Tutorial bin ich zuversichtlich dass das was wird ! :)
Viel Erfolg! Und man lernt beim Durchführen und dann halt gegebenenfalls auch beim Fehler machen. Also mutig ran und wenn beim ersten Mal was nicht klappt, dann beim nächsten Mal!
Sie sagen, dass kleine Proteine / Fragmente vor dem Bromphenolblau ankommen könnten, also schneller wären. Bei der SDS-PAGE sind aber doch die größten Moleküle die schnellsten, da sie am meisten SDS an sich binden und damit die stärkste (negative) Ladung haben. Somit bin ich von Ihrer Aussage verwirrt.
Die größten Fragmente lagern zwar am meisten SDS an, was dann über die Spannung auch zur größten Kraft führt, da aber das SDS immer etwa proportional zur Länge und damit Masse des proteins angelagert wird, wirkt diese größere kraft auch auf eine entsprechend größere Masse. Daher werden alle Proteine mehr oder weniger gleich stark beschleunigt und die Wanderungsgeschwindigkeit hängt in erster Linie vom Widerstand des Gels ab, der wieder für größere Proteine höher ist - die kommen schwerer durch die Lücken - deshalb wandern große Proteine langsam und kleine schnell.
Die allermeisten Menschen dürften wohl mit dem Peleusball weniger Feinkontrolle haben als mit einer Kolbenhubpipette. Aber wenn Sie mit der Glaspipette mehr Erfahrung haben und besser zurechtkommen, verwenden Sie die.
@@rolandgromes636 danke für die Antwort In der Universität wird die Glaspipette verlangt zum Gießen, aber die bessere Kontrolle hat man mit Sicherheit mit der Kolbenhubpipette. Daher verstehe ich nicht welchen Vorteil die Glaspipette bietet.
@@malyn.5329 Technisch ist das meist größere Volumen sicher ein Vorteil. Die Kosten und Müllvermeidung was Pipettenspitzenverbrauch angeht könnten natürlich auch eine Rolle spielen
Die Lauffront erkennen Sie an der blauen Färbung durch Bromphenolblau im Auftragspuffer (und/oder im Sammelgel), da das kleine Molekül in den allermeisten Systemen schneller läuft als die Proteine, die Sie analysieren wollen. Ohne einen solchen Farbstoff ist die Lauffront nicht sicher erkennbar
