Интересно было бы про колонию растительных культур. Когда-то выращивал хлореллу с ней естественно намного проще. Можно выращивать смешанные культуры? Думаю потенциал такой технологии огромен.
раньше был метод: брали эксикатор, зажигали там свечу, частично выгорал кислород и ставили в термостат на 37 градусов. Фиброблатсам хватит, нейроклеткам - нет.
Здравствуйте. Скажите пожалуйста амоксициллин подойдет в качестве антибиотика, стрептомицин трудно найти. Что можно применить вместо антимикотика ? Амфотерицин б тоже найти трудно. Культуральные флаконы вы зарытыми ставите в инкубатор или с открытой крышкой? Из чего можно взять первичный клеточный материал кроме мышей?
В принципе подойдёт. Антибиотик-антимикотик продаётся культуральный - 20 и 100 мл 10 кратного раствора цена где-то 15 долларов за 20 мл. Стрептомицин и амфотерицин есть в ветаптеках. Можно в растворе купить гатифлоксацин или ципрофлоксацин - с ними проще - 1 мл на 500 мл среды. Флаконы должны вентилироваться: ставить с закрытой крышкой, но не до упора, недовинчивая несколько витков. Они бывают с вентилируемой крышкой и фильтром - эти можно дотянуть. Кроме мышей можно взять плоды крыс или другого животного. Проще начать с фибробластов кожи плодов грызунов- они растут практически всегда.
@@prokopiukvolodymyr6630 Спасибо. Скажите какие преимущества культуральных флаконов над планшетами на 6 лунок или пластиковых чашек петри? Какие могут быть причины плохого прикрепления клеток к поверхности флакона после пересева? Имеет ли смысл сражаться за инфицированную культуру?, плавают черные включения.
Проблемно. 5% СО2 не сделаешь, проверял (там описана идея зажечь свечу, что бы кислород частично выгорел) . Хотя некоторые линии живучие, может получится в термостате.
Да, там обычно объективы на 4, 10, 20, 40. то есть увеличение 40, 100, 200, 400. 250 - многовато, но реально. Удобнее 100-200. Главное, что бы был фазовый контраст, иначе плохо видно, но лучше чем ничего.
Не совсем понял, почему они прилипли к стенкам. Но по отделению клеток: Версен (ЭТДА), можно с трипсином, но не обязательно. Механически максимум струёй среды из пипетки (набираете в том же флаконе и по нему "гоняете"). Все скребки не работают, они рвут клетки, выживаемость близка к нулю. Если клетки не приобрели шарообразную форму, Вы их не снимите.
@@prokopiukvolodymyr6630Спасибо. С водой действительно лучше отделяются. Механически попробовал постукивать по матрасу вроде тоже ускорило процесс. Хотя мб нужно больше ждать с трипсином.
Да, я так тоже пробовал. Для отработки методов пойдёт, но для длительных экспериментов вряд ли. Выростить культуру фибробластов или гепатоцитов до монослоя получится.
