AULA PRÁTICA: CONSTRUÇÃO DE CURVA DE CALIBRAÇÃO EM ESPECTROFOTÔMETRO 

Puxa, Thiago, agradeço! Valeu mesmo, me sinto muito grato, pois a aula foi gravada de uma forma bem caseira e tem uma ótima aceitação entre os estudantes apesar disso. Obrigado e, precisando, fico à disposição por aqui. Abraços.

Obrigado, Sandra! Essa foi uma das primeiras aulas práticas que gravei! Estava super tímido! Hahaha... em breve quero regravar com mais qualidade de áudio e vídeo. Muito obrigado!

Eu que agradeço o retorno, Catiane! Bons estudos!

Oi, Lourdes! Obrigado pelo comentário. Espero ter ajudado. Abraços, até breve!

Obrigado pelo elogio! Bons estudos!

Boa noite, Wallace! Que bom que ajudou, esse é o intuito principal do canal. Se você ver mais algumas aulas verá que começou como um canal de aulas simples mesmo (pouca qualidade de imagem, som, luz, etc...). Aos poucos fui melhorando a qualidade dessas coisas, mas com a pandemia não consegui quase gravar mais aula prática nenhuma. Se puder recomendar o canal a quem mais se interesse por esses assuntos, também fico muito grato. Até breve, então e boa sorte na sua pesquisa!

Valeu, Luiz!! Obrigado!

Que legal! Sucesso e boa sorte!!!

Valeu, obrigado!

Marlos, boa tarde! Meu sincero muito obrigado. A cada dia vamos melhorando a qualidade dos conteúdos e as postagens. Precisando, fico à disposição. Abraços.

Valeu, Adriana! Obrigado e bons estudos!

Obrigado, Lana!!

Valeu, obrigado!

Obrigado, Alessandra! Essa calma toda aí é só disfarce! hahaha... Abraços!

Muito obrigado! Se puder compartilhar e recomendar para mais pessoas que se interessam pelo assunto, eu agradeço muito! Abraços!

Muito obrigado, Frank!!

Obrigado, Nelma! Bons estudos!

Boa noite, Maria José! Que bom, que bom! É uma das primeiras aulas aqui do canal, mas ainda muito válida. Fico sempre à disposição para outras dúvidas e esclarecimentos. Abraços!

Fico muito agradecido pelo retorno! Espero que te ajude mesmo e, caso tenha ficado com alguma dúvida, pode postar aqui que vamos trocando uma ideia. Valeu, abraços!!!

Valeu, Allan!!! Muito Obrigado!

Muito obrigado, Sarah! Espero que tenha ajudado. Abraços!!!

Oi, Mariana, boa tarde! Espero mesmo que tenha te ajudado. Se puder recomendar e compartilhar com mais pessoas que se interessam por esse assunto eu agradeço bastante também. Abraços e bons estudos. Em caso de dúvida, posta aqui que eu tento responder.

Muito obrigado, Thiago! Valeu mesmo! Precisando, fico à disposição. Se puder recomendar o canal para pessoas que tbm podem gostar dos conteúdos eu fico muito grato também. Valeu!!!

Muito muito muito obrigado, Arnaldo! Forte abraço!

Eu que agradeço pelo comentário, Manu! Valeu!

Obrigado, Emanuel! Em breve começarei a gravar coisas novas! Abraços!

Muito obrigado!! Se puder recomendar esse conteúdo para mais pessoas interessadas, eu fico muito grato também. Abraços.

Oi, Tatiane! Bom, confesso que nunca trabalhei com o 2,4-D, apenas compostos mais "do dia-a-dia". Mas essas soluções salinas não alteram a intensidade da cor segundo a concentração do 2,4-D? Se isso ocorrer, ou seja, se conforme a concentração do 2,4-D o meio se tornar mais ou menos intenso, é possível fazer a leitura, ainda que de forma indireta, assim como ocorre com a DQO. Afinal, na DQO, o que lemos no espectro é a intensidade do dicromato de potássio que muda conforme uma maior ou menor concentração de matéria orgânica. Seria esse seu caso, também? Vamos conversando! Até já!!!

Emeson, boa noite, tudo joia? Rapaz... confesso que não sei exatamente onde encontrar essa metodologia. Vou pesquisar e se encontrar te aviso. Quanto ao material, você poderia me mandar um e-mail em fabio.ceprocamp@gmail.com ? Eu respondo com os slides que tenho mostrando o passo-a-passo pra calcular os coeficientes manualmente. Abraços, fico no aguardo!

Oi, Edemilson! Joia? Bom, minha área é mais água e esgoto, mas bora lá, vamos tentar nos ajudar sim. Pode mandar a dúvida que eu vejo se consigo dar um suporte! 😉

Oi, Natalia... olha, essa eu acho que vou ficar devendo. Nunca fiz. O que poderia pensar aqui comigo é fazer esse ensaio por meio de uma curva igual a da DQO, oxidando o açúcar em meio ácido na presença de dicromato de potássio. Como o açúcar é matéria orgânica pura, eu faria esse ensaio de forma bem diluída, mas acho que é possível conseguir isso.

Oi, Túlio, joia? A curva de DQO fui eu quem inseriu sim, mas a de surfactantes não. Aqui no meu canal eu tenho uma aula prática ensinando a fazer a curva de DQO a partir do padrão de biftalato de potássio. A curva de surfactantes, por enquanto, vou ficar devendo. Logo que eu achar o link eu posto aqui pra vc o vídeo de DQO. Abraços, até já!

ru-vid.com/video/%D0%B2%D0%B8%D0%B4%D0%B5%D0%BE-3TvUpXITT-E.html

Muito obrigado. Perguntei sobre esses parâmetros, Porque estou com um problema com surfactante em uma ETE, e gostaria de implantar esse método para poder monitorar melhor.

João, muito obrigado pelo retorno!!! Valeu mesmo!! Bom, falando bem francamente, nunca analisei fosfato diretamente, mas se eu fosse realizar esse ensaio com essas características que você me passou, eu faria 2 curvas de calibração: - 1 curva com frações de 100 em 100 mg/L até 500 mg/L (para amostras que possam ter um valor bem alto, como vc mencionou, de 100 mg/L) - 1 curva com frações de 20 em 20 mg/L até 100 mg/L para frações menores e dentro do limite de sensibilidade. Na hora de realizar o ensaio eu também faria (se possível) a diluição da amostra em 10x, além de analisar a amostra bruta também. Finalmente, eu compararia os resultados e verificaria a precisão dos métodos. Claro que estou falando isso como se você tivesse todo o tempo do mundo, hahaha, mas acho que é uma possibilidade para dar mais precisão aos seus resultados. Bom, vamos nos falando e trocando ideias e tenho certeza que acharemos uma saída. Abraços.

@ Pois é professor, tempo é o que mais me falta, por isso pensei numa curva para eu aproveitar para todas as analises (frações orgânicas e inorgânicas que costumam dar bem baixas e fósforo total que da bem mais alto) assim pensei em uma curva com 10 pontos, 0; 2,5; 5; 10; 20; 30; 40; 50; 60; e 70 mg/l, detalhe que esqueci de mencionar é a sensibilidade do método que é de 3 a 61 mg/l, ou seja pensei que não faz muito sentido inserir pontos de curva que está muito fora da sensibilidade do método (pois tais resultados não são válidos), ou seja pensei em fazer diluições decrescentes para que eu encontre resultados dentro da minha curva e consequentemente dentro da precisão do método. Tenho mais uma duvida que não quer calar, existe algum limite de diluições desde que sejam feitas com precisão? Pensei em diluir ate 20x meu extrato de fósforo para analisar no espectro. Você sabe me dizer se posso diluir quantas vezes achar necessário desde que seja com precisão? Logicamente que iria usar micropipetas. Agradeço muito por responder eu.

@@JoaoBatista-yr3it Seu raciocínio está excelente e eu concordo. Tem mais sentido fazer essas faixas intermediárias que você mencionou, ainda que sua solução estoque seja de 500 mg/L, uma vez que esse método a ser empregado tem o teto de 60 mg/L. Até onde me consta (embora eu não tenha lido o método mencionado) não há limite de diluições, sendo que isso ficaria restrito à capacidade de leitura do seu equipamento. Supondo que se você dilua em 20x e isso acrescente algo na ordem de um milésimo na leitura de sua absorbância, isso comprometeria a capacidade do equipamento que, geralmente, tem seu limite na faixa dos centésimos. Mas, a priori, desconheço limites para diluições. Desculpe a pergunta: esses ensaios que você fará serão para alguma pesquisa ou são particulares (para empresas, etc). A finalidade da minha pergunta é a seguinte: se for publicar esses resultados, você pode procurar na bibliografia se alguém já passou por algo parecido e, inclusive, entrar em contato direto com pesquisadores. Novamente, vamos conversando que fiquei curioso pra saber a saída possível para seu ensaio! Abraços e até breve.

@ Na verdade é para minha pesquisa de mestrado, terminei a graduação e fiquei muito tempo parado e agora que estou retornando meus estudos estou penando bastante. A extração ácida do fósforo parte de uma amostra de 0,2 g, então pensei que é melhor diluir o extrato do que deturpar o método, como por exemplo usar somente 0,1g da amostra inicial para o ataque ácido. Enfim vou usar uma micro pipeta de 0,5 a 5 mls (curva e extratos das amostras) , acredito que me dará um ótima precisão. Eu agradeço demais a ajuda, eu já até enviei e-mails para autores de trabalhos similares ao meu mas não tenho resposta, você é a primeira pessoa que me ajudou sem me conhecer, lhe desejo o maior sucesso possível na sua carreira de professor!!!!

@@JoaoBatista-yr3it obrigado! E paciência... ralei bastante no meu mestrado também (isso lá em 2007/2009) mas na época os autores a quem eu escrevia me respondiam rapidamente. E olha que eram pessoas do Japão, Suécia... com fuso horários bem diferentes mas respondiam, então. Paciência! Boa sorte e fico à disposição aqui. E tem aquela piadinha acadêmica: se der errado, coloca isso na discussão e como sugestão para trabalhos futuros! hahaha... mas espero que isso não ocorra!

Oi, Gaby, tudo bem? A minha resposta para sua dúvida é: VOCÊ QUE MANDA! hahaha Se você fizer a regressão linear usando X como absorbância e Y como concentração, assim será! Se fizer o inverso, assim será também. A matemática aceita! MAS... Você tem que ver o seu equipamento. No caso do meu laboratório, usamos um DR 2500 da Hach e a curva de calibração do instrumento pede que Y seja a concentração e X a absorbância, tal qual fiz no vídeo. Espero ter respondido, senão, vamos conversando. Abraços!

Muito boa sua explicação

Milton, na verdade o comprimento de onda foi de 460 nm (e não 420). A absorção máxima dessa substância ocorre em 464 nm em pH 7. Esses valores estão na literatura científica, em vários estudos que usaram essa mesma substância. Na internet tem bastante literatura sobre isso e praticamente todos autores usam comprimentos de onda entre 460 e 500 nm. 😉

@ Ok. Este valor é escolhido pelo operador, que retira da faixa, não é isso?

@@miltonmaiayoutube2384 isso! Com base na literatura convencional, sabemos que o tom laranja tem uma boa absorção de ondas entre cerca de 450 e 500 nm. No meu caso a experiência com as aulas práticas me mostrou que para meu reagente e nas condições de aula que uso, 460 nm era o comprimento de onda que apresentava melhor resultado, menores variações e erros. Por isso uso 460 nm.

Boa tarde. Essas soluções com concentrações conhecidas e pré-determinadas são necessárias para todas as análises onde for necessária a construção de uma curva de calibração. Na aula gravada eu utilizei apenas o alaranjado de metila (pois a finalidade é somente didática) mas para cada substância que você for analisar (DQO, sulfatos, ferro, manganês, etc.) você terá que criar uma curva individual e inserir no espectrofotômetro. Espero ter respondido sua dúvida, senão, vamos nos falando aqui. Abraços.

Obrigado muito pela ajuda.

Oi, Juliano! Pois é... estouraram sim 😅 Até peço desculpas, pois foi uma aula gravada no começo do canal, quando eu não conseguia editar certinho e era um tempo de pandemia, então, não tive como regravar. Mas o correto seria realizar a diluição das amostras pra que os resultados ficassem mais fieis. Mas é isso aí... estourou! Valeu, até já!

Carmona, bom dia!!! Dá uma olhada nessa minha aula aqui: ru-vid.com/video/%D0%B2%D0%B8%D0%B4%D0%B5%D0%BE-G4mau4Tchow.html Ela é bem antiga, eu a gravei quando eu não fazia edição dos vídeos, mas acho que dá pra entender. Se mesmo assim isso não te ajudar, me manda outra mensagem que tento te ajudar de outra forma. Abraços e bons estudos!

Ah, que joia! Vai montando as curvas, aperfeiçoando, afinando os valores, logo logo isso vai funcionar 100% pra vc!

Olá, Arnaldo! Boa noite! Deixe-me ver se entendi direito seu procedimento antes de tentar te ajudar: - Você dilui sua amostra utilizando 10mL da amostra bruta em 100 mL de água, certo? - Você retira 2 mL dessa diluição e coloca na cubeta com o reagente de DQO e procede a leitura, então, ok?! Bom, ao que me parece, a diluição se faz necessária pois o reagente pode não funcionar muito bem em amostras muito concentradas, por isso é necessária a diluição (você comentou aqui que é um reagente para leituras abaixo de 1000 mg/L O2). Ou seja, a diluição é pra garantir que o resultado esteja dentro da faixa de reação e leitura (estou supondo aqui...). Mesmo que você tenha uma amostra com DQO altíssima, tipo 7 mil mg/L O2, ao fazer a diluição isso reduzirá em 10x, estando dentro da faixa de leitura. Não se esqueça depois de multiplicar seu resultado por 10, pois sua amostra está diluída. Esses 2 mL devem ser o mínimo de amostra que a cubeta requer para o feixe luz transpassar. Claro que estou dizendo tudo isso no campo teórico, com base nas informações que você me passou, hahaha... São suposições, mas acredito que sejam esses os motivos. Caso não tenha respondido o que você queria saber, vamos nos falando mais por aqui para irmos elucidando esse caso! Abraços, até já!

@ exatamente, então pelas suas aulas acredito que esse 2 ml foi feito em uma curva ,isso? E suas palavras corretíssimas não foram suposições,isso que fazemos. Pq a minha dúvida ,estou querendo criar outra curva ,a partir dessa amostra

@ obrigado

@@arnaldogodoy6083 Isso! Acredito que o fabricante já tem uma curva pré-estabelecida que cria uma relação entre o seu equipamento e o reagente que eles vendem. É bem provável sim. Você, então, quer criar uma outra curva? Mas tem uma finalidade específica?

@ sim. A DQO final ,acho que não está correta

Oi, Giordano, confirma se os valores inseridos foram esses que vou colocar aqui embaixo. Acabei de refazer no Excel e cheguei novamente aos mesmos valores do vídeo. Por causa da baixa resolução da imagem no vídeo pode ser que algum valor inserido na sua fórmula não seja o mesmo que aparece no caderno. Vamos lá: Absorbância (x) ; Concentração (y) 0,000 ; 0,0 0,446 ; 2,0 0,892 ; 4,0 1,310 ; 6,0 1,745 ; 8,0 2,254 ; 10,3 E fazendo a regressão linear pelo Excel tenho os coeficientes angular de 4,5872 e linear de -0,0318, com um R² de 0,9999. Joia? Mas se continuar dando erro me avisa que procuramos saber o que pode estar ocorrendo. Boa sorte!!!