Ag, conjugado unido a enzima peroxidasa. 1- Fijación del Ag al pocillo 2- Bloqueo de pocillos 3- incubación con el conjugado y formación de inmunocomplejo 4- Incubación con sustrato-cromógeno: cambio de color por reacciónde oxidación. Se paraliza reaccióncon H2SO4. Medir con espectrofotometro.
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En la ELISA Directa, los antigenos de la placa deben ser los que reconocerean los anticuerpos que queremos detectar. En el ejemplo corresponden a los del virus.
Esos antigenos no pegados pero presentes en el pocillo podrían unirse a los anticuerpos de la muestra y ser eliminados en lavados posteriores, modificando el resultado de la prueba.
Que diferencia hay entre los métodos de el Elisa?.son más eficaces?o se aplican ah la distinta generación de pruebas?por favor agradecería un comentario..yo tengo una Elisa con detección de vih1 y 2 y antígeno p24 método quimioluminescencia directa...quería saber q tipo de prueba es esa?ya q no dice q generacion
el elisa directo reconoce antigenos y el indirecto anticuerpos. Creo que la partde fundamental no lo explico, y es que cuando agregas el antigeno a medir en el pocillo, anteriormente tenes que tener tu anticuerpo anti el antigeno a medir. Es decir, en este caso tenia en su posillo anticuerpos Anti HBsag, por eso es que se unen. En el elisa indirecto es al reves, en el posillo vos tenes el antigeno a medir, y usas el suero del paciente para ver si tiene anticuerpos ante ese antigeno, y despues usas un anticuerpo anti anticuerpo conjugado con la enzima para ver si hubo interaccion Ag-Ac
